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    來自結直腸癌的病人類器官原代培養(yǎng)

    發(fā)布時間： 2024-04-19　　點擊次數： 708次
    一、操作步驟

    1.組織 4℃ 條件下從醫(yī)院取回。
    2.消毒取樣的 15ml 管，取出組織，放到 10ml 大皿中。
    3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡，清洗組織。
    4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。
    5.將組織剪成 1mm3 大小的組織塊，轉移到 15ml 管中消化。
    6.在 37℃ 水浴鍋中，消化 15min。
    7.取少量液體在顯微鏡下觀察，看到較多的單細胞和較少的細胞簇后，終止消化。
    8.用 100μm 篩過濾，然后 300g4℃ 離心 5min，移去上清。
    9.重懸沉淀，轉移到 2ml 離心管中，300g4℃ 離心 5min，移去上清。
    10.估算沉淀的細胞量，以 1:25 的比例添加基質膠，重懸。
    11.24 孔板鋪板，冰上操作，每孔點膠 25ul。
    12.鋪板后，放到 37℃ 細胞培養(yǎng)箱中 15min 成膠。

    13.然后每孔添加 600ul 結直腸癌類器官培養(yǎng)基，放到 37℃ 細胞培養(yǎng)箱中。


    二、結果展示

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