染色質免疫共沉淀實驗
更新時間:2024-07-26
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染色質免疫共沉淀實驗
染色質免疫共沉淀實驗(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是基于體內分析發(fā)展起來的方法,也稱結合位點分析法,在過去十年已經成為表觀遺傳信息研究的主要方法。這項技術幫助研究者判斷在細胞核中基因組的某一特定位置會出現(xiàn)何種組蛋白修飾。ChIP不僅可以檢測體內反式因子與DNA的動態(tài)作用,還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾 與基因表達的關系。近年來,這種技術得到不斷的發(fā)展和完善。采用結合微陣列技術在染色體基因表達調控區(qū)域檢查染色體活性,是深入分析癌癥、心血管疾病以及中央神經系統(tǒng)紊亂等疾病的主要通路的一種非常有效的工具。
原理
是在活細胞狀態(tài)下以甲醛固定蛋白質-DNA復合物,超聲將其隨機切斷為長度范圍內的染色質小片段,然后加入目的蛋白抗體,通過抗體沉淀靶蛋白-DNA復合物,通過洗脫的方法得到富集的靶蛋白-DNA復合物,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測(PCR分析),從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。
應用
1.組蛋白修飾研究
2.轉錄調控分析
3.**開發(fā)研究
4.有絲分裂研究
5.DNA損傷與凋亡分析
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